文献类型：会议

作　　者：司艳芳 岳锋 李鹏 郭东光 朱艳平 王选年

作者单位：新乡学院生命科学技术学院生物技术研究中心

基　　金：2018年国家重点研发计划(2018YFC1602902)

会议文献：中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集

会议名称：中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会

会议日期：20190727

会议地点：中国天津

出版日期：20190727

语　　种：中文

摘　　要：西马特罗(Cimaterol,CIM)也叫做喜马特洛,塞曼特罗。属于β-受体激动剂的一种,临床上可以治疗支气管炎等疾病,但过量服用会引起人体中毒。西马特罗属于苯胺型β-受体激动剂中的一种。极性中等,k Pa值在9.5左右,多为白色晶体结构[1]。通常能溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇等溶剂。不同的PH值也会影响其溶解状态。目前国内外一些无良养殖场将其添加在猪饲料中,以增加猪肉蛋白质量,减少脂肪量。研究目的:鉴于免疫学检测技术的特点,ELISA现在被作为初步筛选一些药物残留的检测方法。利用ELISA检测时,抗体质量的好坏与否对检测结果至关重要,然而得到特异性高的抗体又取决于高质量的免疫原。针对我国的食品安全问题,迫切的需要一种快捷简便的药残检测体系,为食品检测体系的健全提供支持。材料方法:影响人工抗原免疫原性的主要因素包括载体蛋白的性质、半抗原的分子空间结构、间隔臂的长度和分子结合比等[2]。对于带有氨基的半抗原与载体蛋白的偶联一般采用重氮化法、戊二醛和EDC法,有研究证实,重氮化法适用于芳香胺而GA法适合于脂肪胺的报道[3]。本研究根据CIM的结构综合各种方法的利弊之后采用重氮化法进行完全抗原的合成。用UV、SDS-PAGE、MALDI-TOF-MS三种方法同时鉴定。用偶联成功的西马特罗-牛血清白蛋白(CIM-BSA)完全抗原,抗原50ug/只,与佐剂等体积乳化至"油包水"的状态,然后通过采用背部皮下多点注射的方法注射入兔子体内。先后进行三次免疫,每次免疫间隔14-16天。在第三次免疫后的第10天左右进行耳缘静脉采血。采用ELISA的方法对兔子血清效价进行检测。用包被液稀释偶联成功的西马特罗-鸡卵清白蛋白(CIM-OVA)至5ug/ml,加入至相应的酶标板,100ul/孔,4度包被过夜,次日用PBST洗板三次并排干,用5%脱脂奶粉封闭2h以上。相同的方法洗

关 键 词：多克隆抗体 CIM 完全抗原  

分 类 号：R392]