文献类型：会议

作　　者：赵焕英 张天乐 秦士飞 王天然 郝子洋

作者单位：[1]首都医科大学中心实验室 [2]北京航空航天大学北京学院 [3]北京新羿生物科技有限公司 [4]首都医科大学药学院

会议文献：中国医学装备大会暨2024医学装备展览会会议论文汇编

会议名称：中国医学装备大会暨2024医学装备展览会

会议日期：20240328

会议地点：中国重庆

出版日期：20240328

语　　种：中文

摘　　要：目的:针对北京新羿生物一款C6荧光定量PCR仪进行性能验证和评价,为将来仪器选型、论证提供实验依据。方法:利用高分辨率熔解HRM(High Resolution Melting)、Taq Man探针和等位基因特异性荧光聚合酶链式反应AS-PCR(Allele-Specific PCR)三种常用的荧光定量PCR方法,设计针对乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因的rs671单核苷酸多态性位点(SNP)的基因分型实验,检验国产C6仪器在不同分型方法下的准确性、特异性和稳定性;分型结果除在进口Q6、LightCycler 480Ⅱ荧光定量PCR仪验证外,还进行了一代测序确认。结果:C6仪器TaqMan和AS-PCR两种方法的基因分型结果与进口Q仪器一致,与一代测序结果一致。C6仪器熔解曲线分析展示的是其随温度变化原始熔解曲线及其导数曲线,靠其峰尖Tm值间差别鉴别基因类型,rs671有AA,AG,GG三种类型,Tm值温度相差区间0.2～1.5度。但C6仪器目前没有专用HRM基因扫描分型软件,能对高分辨熔解曲线进行变异分析,样品多了不易分型。结论:通过三种基因分型实验,证实C6荧光定量PCR仪硬件配置优良,温控准确,对多色探针、饱和荧光染料及非饱和荧光染料的信号采集灵敏,分型结果准确;操作软件界面简洁友好,但软件仍有优化空间,去实现结果呈现多样化。

关 键 词：荧光定量PCR仪  仪器性能 高分辨率熔解(HRM)  TapMan探针  等位基因特异性聚合酶链式反应(AS-PCR)  

分 类 号：R197.39]