文献类型：会议

作　　者：赵晓阳 苏雄

作者单位：苏州大学医学部基础医学与生物科学学院生物化学与分子生物学系

会议文献：中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛论文集

会议名称：中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

会议日期：20151025

会议地点：中国湖北武汉

主办单位：中国毒理学会;湖北省科学技术协会

出版日期：20151025

学会名称：中国毒理学会

语　　种：中文

摘　　要：【目的】研究脂肪酸2-羟化酶(Fatty acid 2-hydroxylase,FA2H)在纳米二氧化硅颗粒(Silica nanoparticles,SiO2 NPs)致内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ER stress)发生的肝源HepG2细胞中的表达变化及潜在影响。【材料和方法】以肝源HepG2细胞系作为主要实验模型,分别暴露浓度梯度(0,25,50,100和200ug/m1)的SiO2 NPs和浓度梯度(0,25,50,100和200nM)的毒胡萝卜素(Thapsigargin,TG),其中TG是作为内质网应激的阳性对照。暴露24小时后,MTT法分析细胞活力,Westernblot法检测内质网应激标记物CHOP、内质网应激IRE1通路相关蛋白pJNK和FA2H的蛋白表达水平,RT-PCR法检测FA2H的基因表达水平。同时,以中国仓鼠卵巢细胞系作为验证模型,选取FA2H表达极低CHO细胞(CHO-vec)和hFA2H过表达CHO细胞(CHO-hFA2H),分别暴露浓度梯度为(0,50和200ug/ml)的SiO2 NPs和浓度梯度为(0,50和200nM)的TG,24小时后分析细胞活力,并检测内质网应激标记物P-eIf2α、CHOP及FA2H的蛋白表达水平。2-羟基棕榈酸(2-OH PA)为FA2H的产物,为进一步探讨FA2H对SiO2 NPs暴露引起的内质网应激的潜在影响,先用10μM(R)-2-OH PA(2R)或10μM(S)-2-OH PA(2S)处理HepG2细胞24小时,之后再进行200ug/ml SiO2 NPs暴露24小时。检测内质网应激标记物CHOP及FA2H的蛋白表达水平。以上每组结果均重复三次实验。【结果】细胞活力实验结果表明,本实验中SiO2 NPs/TG所选取的最高浓度所引起的细胞活力衰减均小于35%,即低于IC。在HepG2细胞中,随着SiO2 NPs/TG暴露浓度的升高,CHOP、pJNK蛋白表达水平均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);而FA2H在蛋白及基因表达水平均下降,差异具有统计学意义(p<0.05)。在CHO细胞中,CHO-vec无FA2H表达,CHO-hFA2H大量表达FA2H;内质网应激标记物P-eIf2α和CHOP在CHO-hFA2H中的蛋白表达均低于同处理的CHO-vec,差异具有统计学意义(p<0.05)。在预先经过2-OH PA处理再进行SiO2 NPs的HepG2细胞中,CHOP的蛋白表达水�

关 键 词：纳米二氧化硅 脂肪酸2-羟化酶  内质网应激 脂肪酸保护  

分 类 号：R114]