文献类型：会议

作　　者：王宇健 陈志鸿 杨宗英 谢嘉怡 刘云岗

作者单位：南方医科大学公共卫生学院毒理学系

会议文献：中国毒理学会第十次全国毒理学大会论文集

会议名称：中国毒理学会第十次全国毒理学大会

会议日期：20230408

会议地点：中国广东珠海

出版日期：20230400

学会名称：中国毒理学会

语　　种：中文

摘　　要：目的探究常用的抗癫痫药物卡马西平(CBZ)在人CYP酶作用下能否代谢活化并诱发遗传损伤及其机制。方法利用重组表达不同CYP酶的V79衍生细胞系、内源性表达多种CYP酶的人肝细胞瘤(C3A)细胞系以及各种CYP酶表达相对缺乏的HepG2细胞系,测试CBZ诱发细胞毒性和微核形成;为探明CBZ所致遗传毒性的相关代谢活化酶,采用CYP酶广谱抑制剂ABT、CYP2B6抑制剂Ticlopine以及核受体PXR、CAR及AhR的激动剂RIF、CICTO、PCB126对不同细胞给以共暴露或预处理,分析其对CBZ所致微核效应的影响;并用着丝粒蛋白B(CENP-B)免疫荧光染色分析卡马西平诱发微核是否含着丝粒;通过免疫印迹试验(Western Blot)检测CBZ处理后的C3A细胞及HepG2细胞中γ-H2AX蛋白表达量的变化。结果CBZ明显诱发表达人CYP2B6的V79细胞微核形成(24小时,两个细胞周期),但其对表达其他多种CYP酶的V79细胞无明显作用。C3A细胞在CBZ暴露72小时(两个细胞周期)后,呈现显著的微核效应,且该效应具有明显的浓度依赖性(阈浓度10μM),进而分别通过ABT和Ticlopine共暴露处理后,C3A细胞中的微核效应可被明显阻断。而HepG2细胞经CICTO预处理,CBZ可明显诱发微核形成(阈浓度10μM);经RIF预处理则CBZ所致的微核效应仅在最高实验浓度(40μM)观察到;PCB126预处理的细胞未呈现CBZ所致的微核效应。免疫荧光染色结果显示CBZ选择性诱发CENP-B阴性的微核,CENP-B阳性的微核数无明显变化;Western Blot实验结果显示CBZ可使C3A细胞中γ-H2AX蛋白表达量显著增强,而HepG2细胞中γ-H2AX蛋白表达量无明显变化。结论 CBZ可经CYP2B6代谢活化并产生遗传毒性,所致染色体损伤机制为单纯的致断裂作用。

关 键 词：致断裂  CYP酶  CBZ  代谢活化

分 类 号：R994.3]