文献类型：会议

作　　者：王美 宋厚辉 徐义刚 马嘉伟 孙永学

作者单位：[1]浙江农林大学动物科技学院动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室 [2]浙江农林大学茶学与茶文化学院 [3]浙江省土壤污染生物修复重点实验室 [4]华南农业大学兽医学院国家兽药安全评价(环境评估)实验室

会议文献：中国毒理学会第九次全国青年科技大会暨第二届生物技术药物毒理与安全评价委员会学术会议论文集

会议名称：中国毒理学会第九次全国青年科技大会暨第二届生物技术药物毒理与安全评价委员会学术会议

会议日期：20231029

会议地点：中国福建厦门

出版日期：20231029

语　　种：中文

摘　　要：目的生物反硝化被视为修复环境污染的低成本手段,部分反硝化菌在高水平抗菌药应激下依然维持优异的脱氮性能。反硝化菌能够适应复杂环境变化,近年来发现sRNAs在该过程中至关重要,解析其在sRNAs调控下的环境适应行为有助于寻找新型生态修复策略。方法本研究分别采用转录组与全基因组测序手段,结合微生物共培养技术挖掘Paracoccus denitrificans在抗菌药胁迫下的sRNAs及其在药物压力下的调控行为。结果研究显示在细菌处于对数期时,氟苯尼考(FF)极大地降低了P.denitrificansd的生长速度与生物膜形成能力(抑制比例为38.6%),使得硝酸盐还原过程被抑制了82.4%,而亚硝酸盐的积累量达到了控制组的21.9倍。在FF的作用下,反硝化功能基因nirS、norB、nosD、nosZ的表达显著下调(P<0.001),此外,预测到42个差异表达sRNAs。其中,FF使得sRNAPda200的表达量达到了控制组的10倍左右。序列比对表明,282个假定sRNAs的同源片段可分布于64个菌科,参与调节P.denitrificans的大量代谢途径,有助于促进菌体对抗菌药的压力适应。在多种抗菌药处理下,Pda025、Pda040、Pda200、Pda247和Pdi004均能够稳定转录并参与对特定药物的应答。靶标预测显示,氧化亚氮还原酶编码基因nosZ与Pda200存在紧密的碱基互补配对关系。在FF单独处理下,nosZ与Pda200的表达变化密切相关,均在P.denitrificans的不同生长阶段被显著抑制(P<0.01)。从污染沉积物中分离并鉴定到两株携带完整反硝化酶的高效反硝化菌,分别命名为Pseudomonas sp.SB-1和Thauera sp.WB-2。将它们与P.denitrificans共同组成Alpha-、Beta-与Gamma-Proteobacteria型反硝化聚生体。通过与工程菌pBBR-Pda200/Top10共培养,验证了在FF处理条件下,Pda200显著升高了菌株Pseudomonas sp.SB-1与Thauera sp.WB-2的反硝化功能基因napB、napA与norB的表达(P<0.05～0.001)。结论综上所述,Pda200可作为不同类型反硝化菌�

关 键 词：反硝化菌 功能增强  抗菌药 生态修复  

分 类 号：X172]