文献类型：会议

作　　者：秦建军 周清华 袁淑兰 王艳萍 陈晓禾 何金涛

作者单位：华西医科大学附一院胸心外科 华西医科大学附一院胸心外科 华西医科大学附一院肿瘤研究所 华西医科大学附一院肿瘤研究所 华西医科大学附一院胸心外科 华西医科大学附一院胸心外科

会议文献：2000全国肿瘤学术大会论文集

会议名称：2000全国肿瘤学术大会

会议日期：20001000

会议地点：中国北京

主办单位：中国抗癌协会

出版日期：20001000

学会名称：中国抗癌协会

语　　种：中文

摘　　要：化疗是肺癌多学科综合治疗的重要组成部分,但其对非小细胞肺癌(NSCLC)的效果仍不尽人意。以往的研究表明,丹参酮具抗肿瘤作用,逆癌酮是以丹参酮为主要成分并加入其它抗肿瘤成分的中药制剂,本研究在体外观察了其对人肺癌细胞的生长抑制作用等,现将结果报告如下。材料与方法:细胞培养:A549人肺腺癌细胞系和 PLA-810D 人肺巨细胞癌细胞系由我院肿瘤研究所提供,常规培养传代。药物处理:逆癌酮为我校所制冻干粉剂,以0.02%二甲亚砜 (DMSO)溶解。对数生长期细胞,等量接种于25ml 培养瓶中,细胞数为 2.5×105,24h 后随机分组加药,A549细胞中加入逆癌酮0.5μg/ml、 1.0μg/ml、2.0μg/ml、4.0μg/ml,PLA-801D 细胞中加入逆癌酮0.25μg/ ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml、2.0μg/ml,分别设含0.02%DMSO 的溶剂对照组和含顺铂(DDP)0.25μg/ml 的阳性对照组,每组3瓶,置37℃、5%CO2中培养7天。绘制生长曲线和剂量效应曲线:每天各组随机抽取3瓶细胞,台盼蓝拒染实验,计活细胞数,取平均值,汇制生长曲线。取逆癌酮等5天结果,以剂量为横坐标,生长抑制率为纵坐标,绘制剂量效应曲线。细胞形态观察:倒置相差显微镜下观察上述药物作用后的各组细胞形态学的改变。克隆形成抑制实验:取药物作用4天后的细胞制成单细胞悬液,分别接种入Φ60mm 平皿中,使成500个/10ml,每组3个平皿,置37℃、5%CO2孵箱中培养。镜下观察至12天,见克隆已形成,终止实验,甲醇固定,Giemsa 染色,以50个细胞作为克隆的标准,低倍镜下计克隆数,并计算克隆形成率和克隆形成抑制率。细胞周期测定: 将药物作用4天后的溶剂对照组和实验组(A549细胞中1.0μg/ml 逆癌酮组、PLA-801D 细胞中0.5μg/ml 逆癌酮组)的细胞离心,PBS 洗2次, 70%冷乙醇固定。上机前离心去除固定液,采取碘化丙啶(PI,50μg/ml) 一步插入法,DNA 定量荧光染色,FASCA20型流式细胞仪上机检测,打�

关 键 词：生长抑制作用  肺癌细胞 细胞数 初步研究  

分 类 号：R734.2]