文献类型：会议

作　　者：杨鑫 王红宁 黄勇 柳萍 张安云 周万蓉 夏青青

作者单位：四川大学“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台,四川大学生命科学学院,动物疾病防控生物工程研究中心 四川农业大学动科院动物预防医学生物工程实验室

基　　金：国家“十五”重点科技攻关子课题(2002BA514A-12-5);国家农业科技成果转化基金项目(合同号:05EFN215100243)

会议文献：中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会论文集

会议名称：中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

会议日期：20070920

会议地点：中国江西井冈山

主办单位：解放军军事医学科学院军事兽医研究所;江西省畜牧兽医局

出版日期：20070900

学会名称：中国畜牧兽医学会

语　　种：中文

摘　　要：氯霉素类药物包括氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考。虽然氯霉素和甲砜霉素已经陆续被各个国家禁止在临床上使用,但氟苯尼考所具有的抗菌作用强、毒副作用小等特点使得该药的得到广泛的使用,因此此类药物的耐药性被受关注。本研究根据Genbank上发布的细菌氯霉素类耐药基因Cat1、FloR、CmlA的序列设计了三对引物,确定了反应体系中最佳的引物浓度、MgCl2浓度以及dNTP浓度,优化了三重PCR的反应条件,筛选出了阳性对照。使用本试剂盒检测同一批样品三次结果一致,显示出较高的重复性;能检测出耐药基因的细菌的最低浓度为6.0×102个拷贝/25μl;最佳保存条件是酶与反应体系分开装配,于-20℃冷冻保存,至少可以保存半年。应用该试剂盒检测猪源大肠杆菌57株,8个鸡场分离的鸡源大肠杆菌50株,Cat1、FloR、CmlA三种基因的检出率分别是41.1%、51.4%和36.4%,与药敏试验结果基本符合。本试剂盒对氯霉素类耐药基因的传播、流行调查以及在临床用药方面具有重要的指导意义。

关 键 词：细菌耐药性 三重PCR 耐药基因 氯霉素类 试剂盒

分 类 号：S854.4]