文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN200710028854.0

申 请 日：20070627

发 明 人：肖成祖 杨琴 李智 黄小乐 梁倩茹 陈小飞 郑敦武 陈晓铭

申 请 人：广州铭康生物工程有限公司

申请人地址：510730 广东省广州市经济技术开发区友谊路173号

公 开 日：20090923

公 开 号：CN100543131C

代 理 人：李海波

代理机构：44104 广州知友专利商标代理有限公司

语　　种：中文

摘　　要：本发明公开了一种用于动物细胞无血清结团灌流培养的方法，该方法包括以下步骤：(1)工程细胞在无血清培养基的搅拌培养中驯化；(2)工程细胞在转瓶、方瓶和搅拌瓶的无血清培养基培养中初步结团；(3)细胞在反应罐中用超声-沉降双结合灌流系统进一步结团和进行灌流培养；(4)不定期抽去部分细胞，使罐内细胞保持合适的高密度，并可直接用以扩大生产。采用本发明方法，极大地提高了细胞的结团效率，极大地提高了灌流时细胞的截留效率，使超声灌流系统充分发挥了细胞结团和截留的双重作用，从而使细胞的结团培养真正能用于生产实际，达到降低生产成本，提高细胞密度，延长生产周期，增加产量的目的。

主 权 项：1.一种用于动物细胞无血清结团灌流培养的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)动物细胞在无血清培养基的搅拌培养中驯化；(2)动物细胞在无血清培养基的培养中初步结团；(3)动物细胞在反应罐中用超声-沉降双结合灌流系统进一步结团和进行灌流培养；(4)不定期抽去部分动物细胞，使罐内动物细胞保持合适的高密度，并直接用以扩大生产；其中步骤(3)中所述的超声-沉降双结合灌流系统由超声-沉降二合一灌流柱、可正反转的蠕动泵、可定时和定向地控制蠕动泵转动的自动控制器以及控制超声波发生功率和时间的超声波控制器组成；所述的蠕动泵包括抽液蠕动泵和进液蠕动泵，抽液蠕动泵连接有收液罐，进液蠕动泵连接有贮液罐；所述的超声-沉降二合一灌流柱置于反应罐中；所述的超声-沉降二合一灌流柱由超声室和沉降柱组成，超声室外面设有外套，外套的顶部和侧面设有压缩空气进口和压缩空气出口，侧面设有接线与超声波控制器连接，超声室顶部设有抽液管，抽液管与抽液蠕动泵相连，超声室的下部设有下管；沉降柱的顶部设有小管，侧面设有接口，接口通过软管与超声室的下管连接。

关 键 词：细胞 血清培养基  工程细胞  灌流培养  超声  截留  生产周期  动物细胞 搅拌培养  结合灌流  双重作用  细胞密度 反应罐 高密度  搅拌瓶  流系统  沉降  驯化 血清 方瓶  生产成本  培养  

IPC专利分类号：C12N5/06(20060101);C12N5/02(20060101)