文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN200710034424.X

申 请 日：20070212

发 明 人：曹孟良 辜显旺 田志坚 李磊 邢俊杰 袁隆平 李强 崔玲玲 张朝良 金纬 李煊 孔洁洁

申 请 人：湖南西城杂交水稻基因科技有限公司 长沙杂交水稻基因工程技术研究中心

申请人地址：410205 湖南省长沙市岳麓区杜鹃路888号

公 开 日：20071003

公 开 号：CN101045928A

代 理 人：颜昌伟

代理机构：43114 长沙市融智专利事务所

语　　种：中文

摘　　要：本发明公开了一种克隆野生稻新抗性基因的方法，它包括首先构建供体野生稻可转化基因组文库，再根据已克隆抗稻瘟病基因及抗白叶枯基因的保守序列设计引物，获得扩增产物作为探针，然后使用已标记探针对文库进行磁珠富集，建立候选抗性基因富集文库，最后对富集文库的克隆进行点杂交分析、PCR鉴定、扩增产物的克隆测序分析及功能验证。本发明集成了候选抗性基因克隆技术和磁珠富集文库构建技术，适用于野生稻新抗性基因及其他植物有利基因的克隆。

主 权 项：1、一种克隆野生稻新抗性基因的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)供体野生稻可转化基因组文库的构建；(2)根据植物抗性基因的保守性设计引物进行PCR扩增，用生物素标记扩增产物作为探针；(3)使用已标记探针对文库进行磁珠富集，构建富集文库；(4)对富集文库的克隆进行鉴定分析，包括使用上述引物进行PCR分析、点杂交分析、扩增产物克隆测序分析；(5)对利用富集文库筛选到的阳性克隆进行功能验证，筛选出野生稻新抗性基因。

关 键 词：克隆 抗性基因 富集  野生稻 文库  扩增产物  磁珠  植物有利基因  稻瘟病基因  基因组文库 保守序列 发明集成  功能验证  设计引物  文库构建  杂交分析  白叶  供体  探针  基因 转化  分析  

IPC专利分类号：C12N15/29(20060101);C12Q1/68(20060101);C07H21/04(20060101)