文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201210181068.5

申 请 日：20120605

发 明 人：余晓峰 郑海松 孙娟娟 宗凯 陈雪娇 李云飞 姚剑 严轶

申 请 人：安徽出入境检验检疫局检验检疫技术中心

申请人地址：230022 安徽省合肥市包河区屯溪路329号

公 开 日：20121003

公 开 号：CN102703571A

代 理 人：金惠贞

代理机构：34114 合肥金安专利事务所

语　　种：中文

摘　　要：本发明公开了采用免疫磁珠分离技术检测脱水蒜制品中沙门氏菌的方法。该方法包括如下操作步骤：（1）将蒜粉加入灭菌稀释液，均质后经带滤膜的均质袋过滤，得滤渣；（2）用灭菌稀释液边振荡边洗涤滤渣三次，合并三次的洗涤液；（3）将沙门氏菌免疫磁珠缓冲液和合并的洗涤液振荡；（4）离心分离，得到离心沉淀物；（5）在离心沉淀物中加入缓冲蛋白胨水增菌液，培养24小时；（6）移取培养液，再加入亚硒酸盐胱氨酸增菌液进行增菌培养，培养结束后使用全自动细菌检测系统（VIDAS）检测脱水蒜制品中沙门氏菌。本发明利用免疫磁珠技术建立脱水蒜制品中沙门氏菌的快速检测，这一技术具有特异性强、灵敏度高的优点。

主 权 项：1.一种检测脱水蒜制品中沙门氏菌的方法，其特征是：（1）取蒜粉25g，加入225mL灭菌稀释液均质，经过有滤膜的均质袋过滤，吸取滤液，并得到滤渣；（2）对滤渣进行第一次洗涤，即在滤渣中加入50mL灭菌稀释液边振荡边洗涤，振荡速率为70次/分钟，振荡时间为20分钟，得到第一次洗涤液和第一次滤渣，对第一次滤渣按第一次洗涤条件进行洗涤，得到第二次洗涤液和第二次滤渣，对第二次滤渣按第一次洗涤条件进行洗涤，得到第三次洗涤液和第三次滤渣，合并第一次洗涤液、第二次洗涤液和第三次洗涤液，得到合并液；（3）在合并液中加入浓度为10mg/mL的沙门氏菌免疫磁珠缓冲液10-40μL，在温度25℃下振荡，振荡速率为70次/分钟，振荡时间为30分钟，得振荡物；（4）将振荡物在转速1800转/分钟条件下离心分离5分钟，接着在转速10000转/分钟条件下离心分离10分钟，除去上清液，得到离心沉淀物；（5）在离心沉淀物中加入500 mL缓冲蛋白胨水增菌液（参照国标GB4789系列），温度36℃培养24小时，得到培养液；（6）在1mL培养液中加入10 mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液（参照国标GB4789系列），温度36℃下培养24小时，所得培养物用全自动细菌检测系统（VIDAS）检测其中沙门氏菌的含量，检测得到的沙门氏菌含量即为脱水蒜制品中沙门氏菌的含量。

关 键 词：沙门氏菌 脱水  离心沉淀物  免疫磁珠 稀释液  洗涤液  灭菌  振荡  缓冲  菌液  培养液  免疫磁珠分离 培养  技术检测  快速检测  洗涤滤渣  细菌检测 亚硒酸盐 合并  蛋白胨  灵敏度  胱氨酸  滤膜  滤渣  蒜粉 过滤  检测  

IPC专利分类号：C12Q1/10(20060101);C12Q1/06(20060101)