文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201010264217.5

申 请 日：20100827

发 明 人：刘钿莲 沈名锋 艾文

申 请 人：丽珠集团疫苗工程股份有限公司

申请人地址：519045 广东省珠海市金湾区小林镇商都街6号国土综合楼5003房

公 开 日：20120125

公 开 号：CN102327608A

代 理 人：曹津燕

代理机构：11280 北京泛华伟业知识产权代理有限公司

语　　种：中文

摘　　要：本发明提供一种乙型脑炎疫苗的纯化方法，该纯化方法包括以下步骤：将灭活的乙型脑炎病毒浓缩液经聚丙烯葡聚糖分子筛柱层析，洗脱溶剂为pH为7.5～8.5的磷酸缓冲液，紫外检测器波长280nm处检测；收集第一洗脱峰，以带有季胺阳离子的醋酸纤维素膜进行离子交换层析膜层析，采用线性洗脱且洗脱溶剂由体积比为缓冲液A∶缓冲液B＝0～100％匀速变化至缓冲液A∶缓冲液B＝100％～0，其中缓冲液A为pH为7.5～8.5的磷酸缓冲液，缓冲液B为包含500mM/L氯化钠的pH 7.5～8.0的磷酸缓冲液，洗脱速度为200～600厘米/小时；收集NaCl浓度为70～250mM之间的洗脱液。该纯化方法能够在保护疫苗的免疫原性基础上有效地去除杂质，尤其是对产品安全性有重要影响的DNA，同时缩短了乙型脑炎疫苗的纯化时间，降低了生产成本。

主 权 项：1.一种乙型脑炎疫苗的纯化方法，该纯化方法包括以下步骤：(1)将灭活的乙型脑炎病毒浓缩液经聚丙烯葡聚糖分子筛柱层析，洗脱溶剂为pH为7.5～8.5的磷酸缓冲液，以紫外检测器280nm处检测；(2)收集第一洗脱峰，以带有季铵阳离子的醋酸纤维素膜进行离子交换层析膜层析，采用线性洗脱且洗脱溶剂由体积比为缓冲液A∶缓冲液B＝0～100％匀速变化至缓冲液A∶缓冲液B＝100％～0，其中缓冲液A为pH7.5～8.5的磷酸缓冲液，缓冲液B为包含500mM/L氯化钠的pH 7.5～8.0的磷酸缓冲液，洗脱速度为200～600厘米/小时；(3)收集NaCl浓度为70～250mM之间的洗脱液。

关 键 词：缓冲  磷酸缓冲液  纯化方法 乙型脑炎疫苗 溶剂  聚丙烯  氯化钠  醋酸纤维素膜 离子交换层析 乙型脑炎病毒 分子筛  产品安全性  紫外检测器  纯化时间  免疫原性  重要影响  膜层析  浓缩液  葡聚糖  阳离子  波长  层析 生产成本  疫苗 检测  

IPC专利分类号：A61K39/12(20060101);A61P31/14(20060101)