文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201210552781.6

申 请 日：20121219

发 明 人：王周平 袁京磊 俞晔 段诺 吴世嘉 夏雨 马小媛

申 请 人：江南大学 中华人民共和国张家港出入境检验检疫局

申请人地址：214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号

公 开 日：20130403

公 开 号：CN103014163A

语　　种：中文

摘　　要：本发明提供了一种基于适配体识别的鼠伤寒沙门氏菌可视化检测方法，其基本原理是在微孔板表面包被亲和素，用生物素化沙门氏菌适配子、纳米金标记的巯基化沙门氏菌适配子识别目标沙门氏菌，在此基础上，再利用银增强技术进一步放大检测信号，实现可视化检测。本方法具有特异性强、灵敏度高、简单、快速的优点，为快速检测环境中的鼠伤寒沙门氏菌提供了可能。

主 权 项：1.一种基于适配体识别的鼠伤寒沙门氏菌可视化检测方法，其步骤为：  1)合成生物素和巯基修饰的鼠伤寒沙门氏菌适配体。  2)制备纳米金  3)制备纳米金-适配体探针  4)亲和素包被酶标板.  5)牛血清蛋白(BSA)封闭酶标板  6)每孔加入10μL浓度为10^-5M的生物素修饰的沙门氏菌适配体，37℃摇床30min。用1×PBS洗涤3次，拍干。  7)每孔加入30μL的样品，37℃摇床30min。用1×PBS洗涤3次，拍干。  8)每孔加入30μL的纳米金-适配体探针，37℃摇床30min。用1×PBS洗涤1次，拍干；再用0.02mol/L的PBN缓冲液(0.3mol/L NaNO₃和10mmol/L Na₂HPO₄/NaH₂PO₄，pH 7)洗涤两次，每次3min，拍干，以除去微孔板中游离的纳米金探针。  9)银增强显色  10)酶标仪检测吸光度值。 

关 键 词：沙门氏菌 鼠伤寒沙门氏菌 适配子 纳米金标记  表面包被  检测信号  快速检测  生物素化 灵敏度  亲和素  检测  适配  微孔  巯基 放大  

IPC专利分类号：C12Q1/68(20060101);C12Q1/10(20060101);C12Q1/06(20060101)