文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201310235337.6

申 请 日：20130614

发 明 人：李玮 张金秀 王立安 李天云 陈娇娇 鞠建松 薛张伟 张琳琳 张庆

申 请 人：河北博伦特药业有限公司 河北师范大学

申请人地址：052260 河北省石家庄市晋州市马于工业园区

公 开 日：20150304

公 开 号：CN103275998B

代 理 人：张素静

代理机构：13100 石家庄新世纪专利商标事务所有限公司

语　　种：中文

摘　　要：本发明公开了一种具有编码高活性反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶的基因片段及其应用，对指孢囊菌（ Dactylosporangium sp . RH1）中反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶（GenBankID:BAA20094.1）基因密码子进行优化获得 p4hyd 基因，对优化后 p4hyd 基因进行截短，获得 P4Hyd<Sub>1-257</Sub> 基因，分别构建重组质粒pET-M-3C-P4Hyd和pET-M-3C-P4Hyd<Sub>1-257</Sub>，通过大肠杆菌进行原核表达，以菌体作酶源转化生产反式-4-羟基-L-脯氨酸。实验结果表明，以L-脯氨酸为底物，相比于pET-M-3C-P4Hyd，pET-M-3C-P4Hyd<Sub>1-257</Sub>转化生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的最高转化率由91.4%提高到97.4%，转化反应时间由80小时缩短到60小时，转化率得到明显提高，转化时间明显缩短。本发明可用于生物转化法生产L-羟脯氨酸，具有较好的工业应用前景。

主 权 项：1.一种编码高活性反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶的基因片段，其特征在于该片段的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

关 键 词：脯氨酸 脯氨酸羟化  转化  基因 工业应用前景  大肠杆菌  生物转化法 最高转化率  反应时间  基因密码 基因片段 重组质粒  羟脯氨酸  高活性 孢囊菌  底物  截短  菌体  酶源  原核  优化  

IPC专利分类号：C12N15/53(20060101);C12N9/02(20060101);C12N15/70(20060101);C12P13/24(20060101);C12R1/19(20060101)