文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201310332402.7

申 请 日：20130802

发 明 人：余涛 应天翼 宋云扬 李艳军 孙道鸣 吴方晖

申 请 人：中国人民解放军63975部队

申请人地址：102205 北京市昌平区阳坊镇中心南街37号

公 开 日：20160120

公 开 号：CN103397077B

代 理 人：刘永盛;赵纪萍

代理机构：11046 中国人民解放军防化研究院专利服务中心

语　　种：中文

摘　　要：本发明供一种以可对乙酰胆碱酯酶催化体系中的两种反应底物硫胆碱和氢离子同时产生灵敏响应的双功能量子点为核心，可灵敏检测乙酰胆碱酯酶活性的测定方法。该发明制备了可同时响应硫胆碱和氢离子的双功能量子点，结合乙酰胆碱酯酶的催化反应，构建了检测乙酰胆碱酯酶活性方法。该体系由巯基乙酸修饰的双功能碲化镉量子点、硫代乙酰胆碱、pH7.5的Tris-HCl缓冲液构成，该方法包括了如下步骤：双功能量子点合成，反应溶液配制和双功能量子点传感体系检测乙酰胆碱酯酶活性。该方法具有原理新颖、灵敏度高、合成方法简易、体系构成简单，无需生物偶联反应等优点，适用于乙酰胆碱酯酶的活性测定及其它与之相关的目标物检测。

主 权 项：1.一种非诊断目的的用于双功能量子点传感体系检测乙酰胆碱酯酶AChE活性的方法，其特征在于双功能量子点传感体系包括巯基乙酸TGA修饰的双功能发光纳米材料碲化镉CdTe量子点QD、硫代乙酰胆碱ATCh、pH7.5的三羟甲基氨基甲烷Tris-盐酸HCl缓冲液，利用传感体系测定AChE的活性的方法步骤如下：将10μL新配的溶于生理盐水的AChE，加入190μL溶有ATCh和QD的，浓度为0.0001～0.0050M的Tris-HCl缓冲液，混匀后样品在35～40℃孵育8～12min后进行荧光检测，所使用的QD合成时Cd²⁺与TGA的摩尔比为1∶0.75～1.75，体系中ATCh和QD的终浓度分别为200～400μM和200～600nM，激发波长350～420nm，扫描范围420～680nm，以波峰处对应发光强度作为采集信号，不同浓度的乙酰胆碱酯酶样品平行测定3份，检测限按3倍空白标准偏差法计算；双功能量子点传感体系的TGA-CdTeQD合成包括如下步骤：称量CdCl₂溶解于蒸馏水后，加入NaCl，再加入不同量的TGA，使得Cd²⁺与TGA的摩尔比为1∶0.75～1.75，调整体系离子强度为0.001～0.150mM，使用0.1M的NaOH将溶液pH调节至10.5～11.6，通入N₂30～60min以除氧，然后快速注入新合成碲氢化钠NaHTe前驱体，使Cd²⁺∶NaHTe摩尔比例为1∶0.25～0.75，溶液于N₂保护下100℃回流4～8hr获得QD，对合成后溶液中存在的沉淀，通过0.45μm的滤膜抽滤去除后，双功能TGA-CdTeQD通N₂保存。

关 键 词：乙酰胆碱酯酶 双功能 量子点 氢离子  胆碱 巯基乙酸修饰  碲化镉量子点  目标物检测  测定方法  催化反应  催化体系  反应底物  反应溶液  活性测定 灵敏度高  灵敏检测  灵敏响应  生物偶联  同时响应  乙酰胆碱 缓冲液  检测  传感  构建  两种  硫代  一种  制备  构成  配制  合成  简易  反应  结合  

IPC专利分类号：C12Q1/46(20060101)