文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201410367679.8

申 请 日：20140729

发 明 人：荣政

申 请 人：四川世红生物技术有限公司

申请人地址：641500 四川省乐至县城西报国桥

公 开 日：20160511

公 开 号：CN104162149B

代 理 人：王文君

代理机构：11002 北京路浩知识产权代理有限公司

语　　种：中文

摘　　要：本发明提供一种猪白细胞干扰素冻干粉针剂及其制备方法，所述冻干粉针剂是由猪白细胞干扰素原液和保护剂按20:4-3的体积比混合冻干制成，原液中包括以下成分：猪白细胞悬液、猪血清、启动干扰素、仙台病毒病毒液和培养液。经原料制备→混和→水浴搅拌诱导培养→离心收获→灭活病毒→解冻除菌→加入保护剂→冻干工序制成。其功能是作为一种广谱抗病毒药物，治疗猪瘟、猪病毒性腹泻、猪病毒性感冒等病毒性疾病。田间控制和推广治疗试验总治愈率为94.57％，人工控制治疗猪瘟和猪病毒性腹泻总治愈率为83.3％和100％。

主 权 项：1.猪白细胞干扰素冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、猪白细胞干扰素原液的制备(1)猪白细胞悬液的制备：无菌采集健康猪鲜血，于4℃3000转/分的无菌条件下离心20分钟，吸取呈灰黄色的中间层白细胞至血浆瓶内，用0.85％NH₄Cl处理两次后离心，收集沉淀白细胞，用Hank′s液洗去残余NH₄Cl，用培养液将沉淀白细胞稀释成悬液；(2)猪血清的制备：无菌采集健康猪鲜血，自然析出，用0.2％CaCl₂处理血浆，除去其中的纤维蛋白，用澄清板K₇板澄清，除菌板EKS板除菌，置于-20℃保存备用；(3)启动干扰素的制备：首次采用人白细胞干扰素作为启动干扰素，以后各次选用前批次效价最高的猪白细胞干扰素作为启动干扰素；(4)仙台病毒病毒液的制备：于36-38℃受精鸡蛋孵化7-15天后，接种仙台病毒，再孵化65-79小时后，收获病毒液，该病毒液的血凝效价为1∶320-1280，置于-20℃保存备用；(5)培养液的制备：向粉剂1640中加入蒸馏水配制成1-2％的1640溶液，加入谷氨酰胺，使1640溶液中谷氨酰胺的浓度为3％，再加入青链霉素，使1640溶液中青链霉素达100-1000单位/毫升；(6)将猪白细胞悬液加入培养液中，使每毫升培养液中含4×10⁷-1×10⁸个猪白细胞，然后向每5000毫升培养液中加入猪血清250-350毫升，再加入启动干扰素，使每毫升培养液中含干扰素抗病毒活性50-150单位，最后加入仙台病毒病毒液，每5000毫升培养液中加入病毒液350-400毫升，得到混合液I；(7)将上述混合液I置于水浴搅拌装置中，以60-80转/分的速度搅拌，30℃诱导培养6小时后，再于37℃诱导培养14小时，其中诱导培养2小时后，用5％NaHCO₃溶液调pH值7.2-7.4，诱导培养6小时后，再用5％NaHCO₃溶液调pH值7.2-7.4，在诱导培养开

关 键 词：猪病毒性腹泻  冻干粉针剂 保护剂  治愈率  猪瘟  冻干  原液  治疗  培养液  广谱抗病毒药物  猪白细胞干扰素 白细胞干扰素 猪病毒性感冒  病毒性疾病  启动干扰素  灭活病毒  人工控制  水浴搅拌  田间控制 仙台病毒 诱导培养  原料制备  制备方法  猪白细胞 病毒液  体积比  猪血清  除菌  混和  悬液  一种  种猪  解冻  混合  收获  试验  推广  加入  

IPC专利分类号：A61K38/21(20060101); A61K9/19(20060101); A61P31/12(20060101); A61P31/16(20060101); A61K35/14(20150101)