文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201610081333.0

申 请 日：20160204

发 明 人：沈凡超 阳国秀 易恢满 夏志兰 姬建军

申 请 人：湖南省宇秀生物科技有限公司

申请人地址：425000 湖南省永州市冷水滩区伊塘镇国家农业科技园

公 开 日：20190212

公 开 号：CN105505778B

代 理 人：杨连华

代理机构：44327 中山市捷凯专利商标代理事务所(特殊普通合伙)

语　　种：中文

摘　　要：本发明公开一种杏鲍菇原始母种的超低温保藏方法，A、制作PDA斜面试管，试管壁上的水珠和水分蒸发消失；B、把原始母种转接到PDA培养基，在恒温箱里22±1℃，黑暗培养16‑18天，使菌丝基本长满培养基；C、按甘油：吐温‑80：纯净水＝15％‑30％：0‑5％：80‑65％的容积比配制甘油剂，分装到耐高、低温的塑料试管中至其1/2‑4/5的总容量,进行高压灭菌后冷却；D、将带菌丝的数个培养基块，转移到试管里，甘油剂没过菌种块，密封；E、将塑料试管在‑18±2℃下先预冷1‑2天，再转移到‑80±5℃的冰箱里长期保藏。本发明能长达8年对杏鲍菇原始母种超低温保藏，并能保证其菌种活力和遗传的稳定性，不易变异，成本低。

主 权 项：1.一种杏鲍菇原始母种的超低温保藏方法，其特征在于，包括以下步骤：A、制作PDA斜面试管，做好后经过无菌检测，把试管壁上的水珠和水分蒸发消失；B、把原始母种转接到上述经检测合格的PDA培养基上面，在恒温箱里22±1℃，黑暗培养16-18天，使菌丝基本长满培养基；C、按甘油：吐温-80：纯净水＝15％-30％：0-5％：65-80％的容积比配制甘油剂，再将其分装到耐高、低温的塑料试管中；每个塑料试管装甘油剂至其1/2-4/5的总容量,进行高压灭菌后冷却，无菌保藏备用；D、在超净工作台内，无菌的条件下把PDA斜面试管内的培养基分切成培养基块，再将带菌丝的数个培养基块，转移到无菌的塑料试管里面，以甘油剂没过菌种块为标准，盖上盖子，用封口膜进行密封；E、将塑料试管在-18±2℃下先预冷1-2天后，再转移到-80±5℃的冰箱里长期保藏；所述A步骤中，PDA斜面试管内的PDA培养基含食用级盐0.8％-1.4％。

关 键 词：原始母种  超低温保藏  菌丝  塑料试管  甘油剂  杏鲍菇 试管  保藏 高压灭菌 黑暗培养  菌种活力  培养基块  水分蒸发  培养基 纯净水  恒温箱  后冷却  容积比  试管壁  总容量  甘油  分装  吐温 预冷  菌种  水珠  密封  配制  冰箱  遗传  制作  保证  

IPC专利分类号：C12N1/04(20060101);C12R1/645(20060101)