文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201610986773.0

申 请 日：20161110

发 明 人：青琳森 王乾龙 丁立生 梁健 饶亮明 李兴德 蒋立银 帅克

申 请 人：中国科学院成都生物研究所 中国科学院成都生物研究所湖州生物资源利用与开发创新中心

申请人地址：610041 四川省成都市人民南路四段九号中国科学院成都生物研究所

公 开 日：20180622

公 开 号：CN106324260B

语　　种：中文

摘　　要：本发明提供了一种牛血清白蛋白检测探针及其制备方法和应用，该制备方法采用廉价的原硅酸四乙酯为原料，使原硅酸四乙酯在氨水的作用下水解合成纳米级的二氧化硅粒子；随后利用3‑氨基丙基三乙氧基硅烷在二氧化硅粒子的表面键合上氨基,得到NH<Sub>2</Sub>‑SiO<Sub>2</Sub>；再然后将BSA键合到NH<Sub>2</Sub>‑SiO<Sub>2</Sub>上，得到BSA‑SiO<Sub>2</Sub>。这种制备方法简单、反应条件温和，容易实现，适合工业大生产。利用BSA‑SiO<Sub>2</Sub>来检测BSA的该检测方法，利用了抗原与抗体的特异性结合反应，同时利用HRP来标记抗体，实现可视化检测，特异性强，灵敏度高。

主 权 项：1.一种牛血清白蛋白检测探针的应用，其特征在于，其包括：步骤a：用辣根过氧化物酶标记羊抗牛血清白蛋白，得到辣根过氧化物酶标记的抗体；步骤b：将待测样品与所述辣根过氧化物酶标记的抗体混合，震荡反应4-8min；随后，再与所述牛血清白蛋白检测探针混合，震荡反应4-8min，离心，得到结合辣根过氧化物酶的牛血清白蛋白检测探针；步骤c：在所述结合辣根过氧化物酶的牛血清白蛋白检测探针中加入四甲基联苯胺溶液，静置12-18min进行显色，随后加入H₂SO₄终止显色，于445-455nm处检测吸光度，采用标准曲线法得出所述待测样品中牛血清白蛋白的含量；其中，所述牛血清白蛋白检测探针的制备方法包括：步骤Ⅰ：将无水乙醇与氨水按照体积比2-4：1混合后再缓慢加入原硅酸四乙酯乙醇溶液，在20-30℃下搅拌1h后，再与3-氨基丙基三乙氧基硅混合，于20-30℃下搅拌16-24h，于40-55℃下干燥，得到氨基修饰的二氧化硅纳米粒子；步骤Ⅱ：将牛血清白蛋白与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺混合，于20-30℃下搅拌1-3h；随后与所述氨基修饰的二氧化硅纳米粒子混合，于20-30℃下搅拌1-3h，得到牛血清白蛋白检测探针。

关 键 词：二氧化硅粒子 原硅酸四乙酯  制备  氨基丙基三乙氧基硅烷  特异性结合反应  制备方法和应用  氨基  氨水 可视化检测  血清白蛋白 标记抗体 表面键合  反应条件  合成纳米  检测探针  特异性强  灵敏度  大生产  检测  抗原  键合 抗体 下水  

IPC专利分类号：G01N33/68(20060101)