文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201910680321.3

申 请 日：20190726

发 明 人：邹检平

申 请 人：北京健平金星生物科技有限公司

申请人地址：100000 北京市海淀区开拓路5号中关村生物医药院A区2层204室

公 开 日：20190917

公 开 号：CN110237277A

语　　种：中文

摘　　要：一种新的肿瘤标记方法，通过放射性碘131标记血管内皮生长因子VEGF实现，<Sup>131</Sup>I标记VEGF抗体通过氯胺‑T法进行，包括用PB液配置氯胺T溶液和Na<Sub>2</Sub>S<Sub>2</Sub>O<Sub>5</Sub>溶液。取一定量VEGF抗体于EP管，置于4℃冰箱中；依次向EP管中加入一定量Na<Sup>131</Sup>I溶液、PB液和氯胺T溶液；立即在电磁搅拌器下搅拌一段时间；迅速加入100μl Na<Sub>2</Sub>S<Sub>2</Sub>O<Sub>5</Sub>溶液终止反应。本发明通过放射性碘131标记血管内皮生长因子VEGF实现，<Sup>131</Sup>I标记VEGF抗体通过氯胺‑T法进行，简便、准确且高效。

主 权 项：1.一种新的肿瘤标记方法，其特征在于，通过放射性碘131标记血管内皮生长因子VEGF实现，¹³¹I标记VEGF抗体通过氯胺-T法进行。具体包括以下步骤：1)用PB液配置氯胺T溶液和Na₂S₂O₅溶液。取一定量VEGF抗体于EP管，置于4℃冰箱中；依次向EP管中加入一定量Na¹³¹I溶液、PB液和氯胺T溶液；立即在电磁搅拌器下搅拌一段时间；迅速加入100μl Na₂S₂O₅溶液终止反应。2)向Sephadex G50柱中加入一定量PB液平衡柱子，待平衡液全部流入柱中后，加入反应液；待反应液全部流入柱床后，用PB液洗脱，流出液收集于EP管中，收集液逐管在放射性核素活度计内测量。继续用PB液洗脱，直至淋洗流出液在活度计内测量活度接近本底再倒入废液瓶。3)取一定量反应管内的标记液和¹³¹I-VEGF抗体峰产品，采用新华1号层析纸作固定相在生理盐水中展开，在层析纸的原点处用毛细管点样，进行标记率和放化纯的测定。第一峰为¹³¹I-VEGF抗体产品峰，第二峰为游离的¹³¹I峰。反应管中的标记液用作标记率的测定，标记率＝层析纸中¹³¹I-VEGF抗体产品峰的放射性计数率/(¹³¹I-VEGF抗体产品峰的放射性计数率+游离¹³¹I峰的放射性计数率)×100％。分离纯化的¹³¹I-VEGF抗体产品峰洗脱液用作放化纯的测定，放化纯＝层析纸中¹³¹I-VEGF抗体产品峰的放射性计数率/(¹³¹I-VEGF抗体产品峰的放射性计数率+游离¹³¹I峰的放射性计数率)×100％。

关 键 词：血管内皮生长因子VEGF  放射性碘 氯胺T  氯胺 电磁搅拌器 肿瘤标记 冰箱 配置  

IPC专利分类号：A61K51/08(20060101);A61K101/02(20060101)