专利详细信息
文献类型:专利
专利类型:发明专利
是否失效:否
是否授权:否
申 请 号:CN201910526781.0
申 请 日:20190618
申 请 人:舟山出入境检验检疫局综合技术服务中心
申请人地址:316000 浙江省舟山市定海区昌国路222号
公 开 日:20220408
公 开 号:CN110346466B
代 理 人:尉伟敏
代理机构:33109 杭州杭诚专利事务所有限公司
语 种:中文
摘 要:一种基于肝脏代谢组学研究硒化氨基多糖对黑鲷免疫机制增强模型的构建方法,涉及生物医药分析领域,包括以下步骤:1)将黑鲷幼鱼均分为实验组和空白组;2)在实验组的饲料中加入硒化氨基多糖;3)将实验组和空白组的黑鲷幼鱼进行饥饿处理,麻醉后,取出肝脏组织,保存备用;4)制备肝脏组织样品,同时制备质控样品,使用超高效液相色谱‑飞行时间质谱联用技术进行处理;5)收集得到的黑鲷肝脏代谢组学数据进行分析处理,识别并筛选出关于硒化氨基多糖对黑鲷免疫机制增强的肝脏代谢组学生物标志物,并对肝脏代谢组学生物标志物指向的代谢通路进行构建和分析。本发明系统性好,准确性高,成本低,操作简单。
主 权 项:1.一种基于肝脏代谢组学研究硒化氨基多糖对黑鲷免疫机制增强模型的构建方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:1)将用于动物实验的黑鲷幼鱼随机均分为实验组和空白组;2)采用相同的饲料饲喂实验组和空白组,并在实验组的饲料中加入硒化氨基多糖;3)饲喂结束后将实验组和空白组的黑鲷幼鱼进行饥饿处理,并用麻醉剂麻醉后,取出肝脏组织,保存备用;4)制备肝脏组织样品和质控样品,随后使用超高效液相色谱- TripleTOFTM 5600+联用技术进行处理,进样时质控样品穿插于肝脏组织样品之间;使用超高效液相色谱-TripleTOFTM 5600+联用技术进行处理的具体方法为:将肝脏组织样品经微孔滤膜过滤之后,在固定的色谱条件和质谱条件下,进入超高效液相色谱-质谱联用仪分析,其中,在液相色谱中C18和HILIC两种色谱柱结合使用,并且,在检测过程中,每隔相同数量的肝脏组织样品插入一个质控样品进行检测分析,以监控检测稳定性;C18色谱柱色谱条件为:流速:0.3ml/min,进样盘温度:4℃,柱温:40℃,流动相A为2mmol/L甲酸铵和0.05%甲酸水溶液,流动相B为乙腈和间苯二甲酸混合液,且乙腈和间苯二甲酸的体积比为1:1,进样量:2µL,流动相梯度洗脱如下表所示: