文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN202210252128.1

申 请 日：20220315

发 明 人：林影 陈美琪 梁书利 韩双艳 郑穗平

申 请 人：林影 广州华南理工大学资产经营有限公司

申请人地址：510006 广东省广州市番禺区广州大学城华南理工大学B6-334

公 开 日：20230526

公 开 号：CN114703159B

代 理 人：崔红丽

代理机构：广州市华学知识产权代理有限公司

语　　种：中文

摘　　要：本发明公开一种葡糖基转移酶突变体及其应用，属于蛋白质工程技术领域。本发明使用生物信息学手段，通过蛋白建模、结构分析等方法确定若干个位于非保守区域的蛋白表面氨基酸，并进行单个或组合突变，得到的突变体在SEQID NO.1所示氨基酸序列的野生型UDP‑葡糖基转移酶中突变A11L、F39Y、S58G、S55P、N109K、A250E、I279L、V304L和T329I中的至少一个位点。得到的突变体较野生型UDP‑葡糖基转移酶热稳定性和酶活均显著提高，在甜味剂甜菊糖苷(莱鲍迪苷D和/或莱鲍迪苷E)的工业化生产中应用，可提高生产效率，降低生产成本，市场前景广阔。

主 权 项：1.一种UDP-葡糖基转移酶突变体，其特征在于：所述的突变体在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的野生型UDP-葡糖基转移酶中的突变为：A11L；或F39Y；或S58G；或S55P；或N109K；或A250E；或I279L；或V304L；或T329I；或S55P和V304L；或S58G、V304L和T329I；或V304L、T329I、F39Y和S55P；或V304L、T329I、F39Y、S55P和N109K；或V304L、T329I、F39Y、S55P、N109K和A11L；或V304L、T329I、F39Y、S55P、N109K、A11L和I279L；或V304L、T329I、F39Y、S55P、N109K、A11L、I279L和A250E；或V304L、T329I、F39Y、S55P、N109K、A11L和A250E。

关 键 词：葡糖基转移酶 突变体 野生型 突变  蛋白质工程技术  甜味剂 氨基酸序列  生物信息学  莱鲍迪苷D  莱鲍迪苷E  保守区域  蛋白表面  结构分析  热稳定性  生产效率  甜菊糖苷 氨基酸  建模  酶活 位点  应用  蛋白  

IPC专利分类号：C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/18;C12P19/56;C12R1/19