文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN202011276093.2

申 请 日：20201116

发 明 人：查磊 郭倩 仝宗军 黄建春 李正鹏 赵妍 余昌霞 杨焕玲

申 请 人：上海国森生物科技有限公司

申请人地址：201403 上海市奉贤区望园路1150号2幢

公 开 日：20220517

公 开 号：CN114503873A

语　　种：中文

摘　　要：本发明提供一种双孢蘑菇液体菌种还原菌种及其栽培方法，属于食用菌液体菌种生产应用技术领域，包括以下方法：(1)母种的制备；(2)液体菌种的制备；(3)菌丝体处理及接种栽培料；本发明通过运用双孢蘑菇液体菌种纯菌丝体栽培，可将固体菌种50天左右的传代周期缩短为12天，减少了菌种的退化可能；通过纯菌丝体栽培，使得菌种的质量和体积变小，大幅减少了运输成本；后期将菌丝体打碎，用无菌水缓冲液稀释后接种，形成的菌丝球大小均一，菌丝球个数多，且萌发点多、发菌快、菌丝生长一致性高；且纯菌丝体保存于4℃冰箱内可存放6d以上，使其菌种的新鲜程度加强，与此同时，纯菌丝体菌种体积小，更便于运输，减少运输成本。

主 权 项：1.一种双孢蘑菇液体菌种还原菌种栽培方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、母种的制备：选取双孢蘑菇二次发酵料干料50g，琼脂条15g，纯净水1L，将双孢蘑菇二次发酵料干料放置进纯净水中煮20min，煮至完成后使用4层纱布进行过滤，得到浸液，将琼脂条投入得到的浸液内，继续加热，加热过程中不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦，待琼脂条完全融化后再将其分装到三角瓶内进行121℃,30min灭菌，灭菌完成后进行倒平板，冷却后接种，25℃培养15d；S2、液体菌种的制备：液体培养基配方为豆粕粉2g，玉米粉2g，蔗糖20g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄ 1g，水1L；称取蔗糖20g，KH₂P0₄ 1g，MgSO₄ 0.5g，纯净水1L进行加热溶解，按照配方2g黄豆粉和2g玉米粉按配方加入500mL三角瓶中，待溶解后，分装250mL在500mL的三角中进行121℃,30min灭菌，冷却后，将S1中培养好的母种接种3mm大小的菌块8-10块到液体培养基中。将接种好的液体菌种，通过磁力搅拌器对其进行搅拌，温度设置为25℃，转速设置为1200r/min搅拌0.5-2h，搅拌完成后，待接种的母种菌块被打碎后，并将三角瓶放置在摇床上，温度设置为25℃，转速设置为150r/min培养12d得到液体菌种，将得到液体菌种进行按照配方豆粕粉2g，玉米粉2g，蔗糖20g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄ 1g，水1L进行发酵罐发酵，发酵得到的液体菌种备用；S3、菌丝体处理及接种栽培料：将通过步骤S1与步骤S2中制备出的菌液菌种通过布氏漏斗进行抽滤，直至漏斗下方不再滴水为止，得到菌丝体，将步骤S3中的菌丝体与无菌水缓冲液(1/0％的KH₂P0₄溶液)按照体积比1:30进行冲洗，直至漏斗下方不再滴水为止，冲洗得到的菌丝体放置进温度4℃的冰箱备用，处理完成的菌丝体与无菌水缓冲�

关 键 词：菌种 纯菌丝体  液体菌种 双孢蘑菇 运输成本  菌丝球 栽培  制备  接种  食用菌液体菌种  传代  菌丝体处理  便于运输  固体菌种 菌丝生长  生产应用  周期缩短  缓冲液  菌丝体 体积小  无菌水  栽培料  变小  发菌  均一  母种  稀释  打碎  还原  冰箱  退化  保存  新鲜  

IPC专利分类号：A01G18/00;A01G18/20;A01G18/50;A01G18/40