文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN202211619800.2

申 请 日：20221215

发 明 人：刘迪 甄军波 刘琳琳 欧阳艳飞 任子蓓 任士福 迟吉娜 周英书

申 请 人：河北省农林科学院棉花研究所(河北省农林科学院特种经济作物研究所)

申请人地址：050000 河北省石家庄市和平西路598号

公 开 日：20230808

公 开 号：CN115843690B

代 理 人：陆文舒

代理机构：河北知亦可为专利代理事务所(特殊普通合伙)

语　　种：中文

摘　　要：本发明涉及植物组织培养技术领域，提出了一种以金银花花药为外植体的再生方法，包括以下步骤：S1、制备愈伤组织诱导培养基M1、愈伤组织诱导培养基M2、分化培养基、生根培养基；S2、获取金银花外植体并灭菌，得到金银花花药；S3、将金银花花药于愈伤组织诱导培养基M1中培养后于愈伤组织诱导培养基M2继代培养至产生胚性愈伤组织；S4、将胚性愈伤组织进行分化培养至形成再生植株，将再生植株转接到生根培养基培养，得到金银花组培苗。本发明提供的培养方法可直接诱导金银花花药产生胚性愈伤组织，简化了生产步骤，缩短了成苗的时间。利用本发明得到的胚性愈伤组织和再生苗方法可用于金银花的基因编辑研究和新品种选育。

主 权 项：1.一种以金银花花药为外植体的再生方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备愈伤组织诱导培养基M1、愈伤组织诱导培养基M2、分化培养基、生根培养基；S2、获取金银花外植体并灭菌，收集金银花花药；S3、将金银花花药于愈伤组织诱导培养基M1中培养后，于愈伤组织诱导培养基M2继代培养至产生胚性愈伤组织；S4、将胚性愈伤组织在分化培养基上分化培养至形成再生植株，将再生植株转接到生根培养基培养，得到金银花组培苗；所述愈伤组织诱导培养基M1以MS为基本培养基，添加葡萄糖25~35g/L，植物凝胶2.0~3.0g/L， 2,4-D 0.05~0.15mg/L，IAA 0.1~0.5mg/L，KT 0.05~0.15mg/L，并调pH值为5.8；所述愈伤组织诱导培养基M2以MS为基本培养基，添加葡萄糖25~35g/L，植物凝胶2.0~3.0g/L，IAA 0.1~0.6 mg/L，KT 0.2~0.6mg/L，并调pH值为5.8；所述分化培养基包括：硝酸钾 1900 mg/L，硝酸镁 320 mg/L，硝酸铵 250 mg/L，磷酸二氢钾 170 mg/L，硫酸铵 220 mg/L，二水氯化钙 400 mg/L，磷酸二氢钠 40 mg/L，七水硫酸亚铁 27.8 mg/L，乙二胺四乙酸二钠 37.3 mg/L，六水氯化钴 0.025 mg/L，五水硫酸铜0.025 mg/L，碘化钾 0.83 mg/L，七水硫酸锌 8.6 mg/L，硼酸 6.2 mg/L，四水硫酸锰 22.3mg/L，二水钼酸钠 0.25 mg/L，肌醇 100 mg/L，硫胺素 0.1 mg/L，盐酸吡哆醇 0.5 mg/L，烟酸 0.5 mg/L，甘氨酸 2 mg/L，谷氨酰胺 1000 mg/L，天冬酰胺 500 mg/L，葡萄糖 30 g/L，IBA 0.2~0.6mg/L，KT 0.10~0.20mg/L，植物凝胶2.5~2.8 g/L，并调节pH值为5.9。

关 键 词：金银花 愈伤组织诱导培养基  花药 胚性愈伤组织  生根培养基  再生植株  外植体 植物组织培养技术  分化培养基 新品种选育  分化培养 继代培养  生产步骤  直接诱导  再生苗 组培苗  灭菌  成苗  可用  制备  再生  基因  研究  

IPC专利分类号：A01H4/00