文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN202311773336.7

申 请 日：20231221

发 明 人：李宏志 刘悦 许立志 明鸿博 李丽珍 李杰

申 请 人：大连晶泰生物技术有限公司

申请人地址：116000 辽宁省大连市经济技术开发区先进装备制造业园区金七路9-2号

公 开 日：20240213

公 开 号：CN117551771A

代 理 人：高盼;李馨

代理机构：大连东方专利代理有限责任公司

语　　种：中文

摘　　要：本发明公开了一种用于检测肿瘤低频突变的单端锚定多重PCR扩增子文库的构建方法和试剂盒，属于分子生物学技术领域。本发明利用分子标签和通用序列组成的短Y接头、特异性捕获引物和带有Index的适用于测序平台的富集引物组成的引物组构建了适用于低频突变检测的多重PCR文库构建方法和试剂盒。本发明设计了与肺癌相关的基因突变捕获引物组合，大幅提高了肺癌MRD检测的灵敏度和特异性，本发明的单端锚定多重PCR扩增的文库构建方法和试剂盒提高了模板分子的利用率并降低了背景噪音，简化了实验流程，降低了MRD检测的操作难度，增加了检测的灵敏度和准确性。

主 权 项：1.一种用于检测肿瘤低频突变的单端锚定多重PCR扩增子文库的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)提取血液ctDNA样本，通过末端修复、末端加A，连接短Y接头后纯化；/n(2)根据所选的目标基因区域设计相应的特异性捕获引物，对步骤(1)得到的产物进行单端锚定多重PCR捕获；/n(3)将步骤(2)得到的产物进行第二轮PCR扩增富集，即得用于检测肿瘤低频突变的单端锚定多重PCR扩增子文库。/n

关 键 词：试剂盒 多重PCR扩增  检测  文库构建  灵敏度  单端 构建  锚定  捕获  肺癌  分子生物学技术  背景噪音  测序平台  分子标签  富集引物  基因突变  模板分子  实验流程  通用序列  突变检测  引物组合  多重PCR 引物组  子文库  引物 突变 肿瘤

IPC专利分类号：C12Q1/6886;C12Q1/6806;C12Q1/686;C40B50/06;C12N15/11