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专利详细信息

用于人类红细胞RHCE基因分型检测的多重PCR引物探针组合、试剂盒及检测方法       

文献类型:专利

专利类型:发明专利

是否失效:

是否授权:

申 请 号:CN202411872496.1

申 请 日:20241218

发 明 人:章婷婷 顾逸飞 孙陈炼

申 请 人:江苏伟禾生物科技有限公司

申请人地址:225300 江苏省泰州市经济开发区药城大道一号新药创制基地二期D幢大楼912室

公 开 日:20250311

公 开 号:CN119592710A

代 理 人:卢霞

代理机构:南京正联知识产权代理有限公司

语  种:中文

摘  要:本发明涉及用于人类红细胞RHCE基因分型检测的多重PCR引物探针组合、试剂盒及检测方法,属于生物医学临床分子检测领域。本发明提供了用于人类红细胞RHCE基因分型检测的多重PCR引物探针组合,本发明还提供含有多重PCR引物探针组合的试剂盒。本发明的技术优势在于:通过改良ARMS技术与同源序列特异性碱基法设计的RHCE基因变异位点特异性引物和探针,实现了更高的特异性和准确性;只需要4孔反应,能够一次性完成RHC、RHc、RHE、RHe、C<SUP>W</SUP>‑/C<SUP>W</SUP>+、C<SUP>X</SUP>‑/C<SUP>X</SUP>+、V‑VS‑/V+VS+、V+/V‑的检测,实现了更高的通量和效率;利用多重荧光PCR结合Taqman探针技术,对人类红细胞RHCE基因进行定性分型检测,相较于传统方法,展现出更高的灵敏度、更快的实验速度、更高的准确性和更广的适用范围。

主 权 项:1.用于人类红细胞RHCE基因分型检测的多重PCR引物探针组合,其特征在于,所述的组合包含12对特异性引物及相应的探针,12对特异性引物及相应的探针分布于4个反应孔中,每个反应孔含有的引物对及相应探针的核苷酸序列如下表所示: 所述的12对特异性引物及相应探针的核苷酸序列,以及12对特异性引物及相应的探针所针对的扩增位点具体如下表所示: 所述的4个反应孔中,每孔还分别包含一对内对照引物及相应一条探针,核苷酸序列如SEQ ID No.25~27所示,用于监控仪器故障、试剂因素、聚合酶活性或样本中的抑制物等因素造成的假阴性结果;SEQ ID No.25~27的核苷酸序列如下:

SEQIDNo 序列5'→3' 25 GCATCTGGACATGCTTGCT 26 ACACACATGGAAGACCACAGA 27 CY55’-CTGTGTTAAAGCTCTGAATAATGGTA-3’BHQ2

关 键 词:人类红细胞 RHCE  基因分型检测 多重PCR引物  探针组合  试剂盒 特异性引物  探针  核苷酸序列  连管  反应孔  核酸样本  样本  分型检测 甲酰胺  引物 分型  荧光定量PCR反应  三羟甲基氨基甲烷盐酸盐  氯化钾  

IPC专利分类号:C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11

参考文献:

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二级参考文献:

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耦合文献:

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引证文献:

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二级引证文献:

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同被引文献:

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