文献类型：会议

作　　者：胡晓星 彭杰 冯悦 刘阳 夏雪山

作者单位：昆明理工大学生命科学与技术学院,云南省分子医学研究中心,昆明650500,云南

会议文献：第十四届中国西部实验动物管理与学术交流会论文集

会议名称：第十四届中国西部实验动物管理与学术交流会

会议日期：20150901

会议地点：昆明

主办单位：中国实验动物学会,云南省实验动物学会

出版日期：20150900

语　　种：中文

摘　　要：目的 分离优化培养树鼩原代肾细胞,并探索EV71对树鼩肾细胞的感染性。方法 胰蛋白酶-EDTA消化法分离得到的树鼩原代肾细胞,分别用10％FBS DMEM、5ng/mL10％FBS DMEM、10％FBS RPMI1640以及5ng/mL 10％FBS RPMI1640四种培养基同时进行培养比较,显微镜下观察细胞生长状态,EV71感染最佳状态细胞,一步法RT-PCR和实时定量PCR检测感染结果。结果 5ng/mL EGF 10％FBS RPMI1640培养的树鼩原代肾细胞,生长速度快,生长状态好,EV71感染树鼩原代肾细胞后在第48h收获的病毒上清,RT-PCR可检测出目的条带,实时定量PCR可检测出比洗涤液高的病毒载量。结论 含5ng/mL EGF的RPM11640完全培养基最适合培养树鼩原代肾细胞,EV71可在分离培养出来的树鼩肾细胞中增殖,在分子水平上验证了EV71对树鼩原代肾细胞具有感染性,这为EV71感染树鼩模型的建立提供理论依据。

关 键 词：树鼩原代肾细胞  EV71 感染  实时定量PCR

分 类 号：S94[水产类] X70]