文献类型：会议

作　　者：彭杰 胡晓星 冯悦 甸子芩 孙鷖 牛华 夏雪山

作者单位：昆明理工大学生命科学与技术学院,云南省分子医学研究中心,昆明650500,云南 昆明理工大学生命科学与技术学院,云南省分子医学研究中心,昆明650500,云南 昆明理工大学医学院,昆明理工大学附属医院,昆明650500,云南 昆明理工大学医学院,昆明理工大学附属医院,昆明650500,云南

会议文献：第十四届中国西部实验动物管理与学术交流会论文集

会议名称：第十四届中国西部实验动物管理与学术交流会

会议日期：20150901

会议地点：昆明

主办单位：中国实验动物学会,云南省实验动物学会

出版日期：20150900

语　　种：中文

摘　　要：目的 本研究旨在建立一种快速准确定量检测人G1型轮状病毒的TaqMan探针荧光实时PCR检测方法.方法 以轮状病毒VP6基因为靶基因,分别设计两对引物及其相应的Taqman探针,扩增目的片段,将目的片段克隆于PCDNA3.1+载体上,体外转录获得RNA,系列稀释后为标准品,建立TaqMan探针荧光实时PCR检测方法并对该方法进行验证.结果 设计实验找到最优条件下的引物浓度(250nm)、探针浓度(300nm)；通过对引起腹泻的人柯萨奇病毒、呼肠孤病毒等进行检测,结果均为阴性,表明该方法具有很好的特异性.该方法的最低检测量为5copies/μL.对该方法进行重复性实验,发现变异率均小于1％,重复性好.用已建立的方法对4份粪便临床样品进行3次重复试验,病毒RNA的检出率为100％.结论 本实验初步建立了人G1型轮状病毒TaqMan探针荧光实时PCR检测方法,为G1型轮状病毒的诊断、检测和分子流行病学研究提供了一种新的方法.

关 键 词：人轮状病毒 VP6基因 Taqman荧光定量PCR  

分 类 号：R44[临床医学类] R37[基础医学类]