文献类型：期刊文章

作　　者：王遵宝[1] 贺笋[1] 李俊辉[1] 刘宏[1] 豆智华[1] 郑侃[1] 李森江[1] 寇春[1]

WANG Zun-bao;HE Sun;LI Jun-hui;LIU Hong;DOU Zhi-hua;ZHEN Kan;LI Sen-jiang;KOU Chun(Tecon Bio-technology Co.,Ltd.,Urumqi 830032,China)

机构地区：[1]天康生物股份有限公司,新疆乌鲁木齐830032

出　　处：《中国预防兽医学报》

年　　份：2020

卷　　号：42

期　　号：4

起止页码：383-388

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2019_2020、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为研制新型、可用于区分野毒感染、助力猪瘟净化的亚单位疫苗,本研究参考了近年来国内猪瘟病毒(CSFV)流行株的E2基因序列,并根据昆虫细胞密码子偏嗜性对其进行优化、合成后,克隆至转移载体中,构建了重组质粒,随后转化至含有穿梭质粒的大肠杆菌DH10Bac,制备了重组杆粒并转染至SF9细胞,获得了表达E2基因的重组杆状病毒。间接免疫荧光试验和western blot检测结果显示该杆状病毒感染昆虫细胞后可正确表达E2蛋白(Bac-E2)。将Bac-E2(50μg/头份)与猪瘟兔化弱毒疫苗[HCLV,7500半数兔体感染剂量(RID50)/头份]分别免疫猪瘟抗体阴性仔猪,3周后用相同的剂量加强免疫。首免后5周Bac-E2组猪CSFV中和抗体均不低于11024,显著高于HCLV组(p<0.01);首免后35 d,利用105.0MLD(最小致死剂量)的CSFV石门强毒经耳后颈部肌肉注射攻毒后,Bac-E2和HCLV组猪的保护率均为100%,阴性对照组猪全部发病、死亡;采用荧光定量PCR检测各组猪口腔和肛门拭子中CSFV的排毒情况,结果显示Bac-E2和HCLV组猪攻毒后0~16 d的咽拭子及肛拭子中均未检测到CSFV核酸。阴性对照组猪攻毒后第4 d至濒死前均可在其拭子中检出高拷贝CSFV核酸。本研究为Bac-E2蛋白作为猪瘟亚单位疫苗的候选抗原蛋白奠定了研究基础。

关 键 词：猪瘟病毒 昆虫细胞 杆状病毒 免疫原性

分 类 号：S852.651]